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Technical service category
技术服务类别
DNA PullDown
DNA PullDown实验是反向筛选 DNA 结合蛋白的核心技术，从已知 DNA 调控元件出发，寻找结合的转录因子、调控蛋白，解决 “已知 DNA 元件，找结合蛋白” 的研究痛点。
将待测 DNA 序列（启动子、顺式作用元件）进行生物素标记，制备双链探针；与细胞核蛋白孵育后，利用链霉亲和素磁珠特异性富集与 DNA 探针结合的蛋白，经洗涤洗脱后，通过 WB 鉴定已知蛋白、质谱筛选未知结合蛋白。
将待测 DNA 序列（启动子、顺式作用元件）进行生物素标记，制备双链探针；与细胞核蛋白孵育后，利用链霉亲和素磁珠特异性富集与 DNA 探针结合的蛋白，经洗涤洗脱后，通过 WB 鉴定已知蛋白、质谱筛选未知结合蛋白。
详情介绍
实验简图
实验流程
1.合成生物素标记的双链 DNA 探针，退火制备；
2.提取高质量细胞核蛋白；
3.探针与核蛋白体外结合，设置突变探针阴性对照；
4.链霉亲和素磁珠富集结合蛋白，严格洗涤去除杂质；
5.洗脱蛋白，WB 验证已知蛋白，质谱筛选未知蛋白。
实验周期
DNA PullDown+wb检测：10-14 个工作日
DNA PullDown+ms检测：25-30 个工作日
需提供样品信息
1.待测 DNA 序列、结合位点信息；
2.细胞 / 组织样本、核蛋白样本。
应用场景
1.启动子 / 增强子结合转录因子筛选与验证；
2.顺式作用元件结合蛋白鉴定；
3.已知 DNA 元件的调控蛋白挖掘。
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