19912401840
Technical service category
技术服务类别
RNA PullDown
RNA PullDown是反向筛选 RNA 结合蛋白的核心技术，从已知 RNA 出发，寻找结合的 RBP、功能蛋白，解决 “已知 RNA，找结合蛋白” 的研究痛点，常与 RIP 互补使用。
体外转录制备生物素标记的目标 RNA 探针，与细胞总蛋白 / 核蛋白孵育，利用链霉亲和素磁珠特异性富集与 RNA 探针直接结合的蛋白，洗涤洗脱后，通过 WB 验证已知蛋白、质谱筛选未知结合蛋白，是体外 RNA - 蛋白直接互作的核心技术。
体外转录制备生物素标记的目标 RNA 探针，与细胞总蛋白 / 核蛋白孵育，利用链霉亲和素磁珠特异性富集与 RNA 探针直接结合的蛋白，洗涤洗脱后，通过 WB 验证已知蛋白、质谱筛选未知结合蛋白，是体外 RNA - 蛋白直接互作的核心技术。
详情介绍
实验简图
实验流程
1.体外转录制备生物素标记的目标 RNA 探针，纯化质控；
2.提取细胞总蛋白 / 核蛋白，全程 RNase-free 操作；
3.RNA 探针与蛋白体外结合，设置突变 RNA 阴性对照；
4.链霉亲和素磁珠富集结合蛋白，严格洗涤去除杂质；
5.洗脱蛋白，WB 验证已知蛋白，质谱筛选未知 RBP。
实验周期
RNA PullDown+wb检测：12-18 个工作日
RNA PullDown+ms检测：25-30 个工作日
需提供样品信息
1.目标 RNA 全长 / 序列信息；
2.细胞 / 组织蛋白样本。
应用场景
1.lncRNA/circRNA/mRNA 的结合 RBP 筛选与验证；
2.体外 RNA - 蛋白直接互作验证；
3.非编码 RNA 调控机制深度解析。
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