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DNA - 蛋白互作类实验
技术服务
EMSA 凝胶迁移实验
EMSA 凝胶迁移实验
EMSA 凝胶迁移实验是DNA/RNA - 蛋白体外直接互作的经典金标准技术,是转录因子、RNA 结合蛋白结合验证的必备实验,可通过竞争实验验证结合特异性,结果直观可靠。
蛋白与标记的 DNA/RNA 探针特异性结合后,形成蛋白 - 核酸复合物,分子量与电荷发生改变;在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中,复合物泳动速度远慢于游离探针,形成滞后的移位条带,可定性、半定量检测核酸与蛋白的体外直接结合。

详情介绍

实验简图


实验流程
1.合成并生物素标记待测 DNA/RNA 探针;
2.提取细胞核蛋白 / 制备纯化重组蛋白;
3.蛋白与探针体外结合,设置竞争对照、突变对照;
4.非变性凝胶电泳分离,转膜后化学发光显影,判断结合条带。

实验周期
EMSA 凝胶迁移实验检测:8-12 个工作日

需提供样品信息
1.待测结合元件 DNA/RNA 序列;
2.细胞核蛋白样本、纯化重组蛋白。

应用场景
1.转录因子 - DNA 元件体外直接结合验证;
2.RNA 结合蛋白 - RNA 探针结合验证;
3.结合位点突变验证、竞争结合实验。

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