19912401840
Technical service category
技术服务类别
BiFC 双分子荧光互补
BiFC是活细胞内可视化蛋白互作检测技术，可直接观察互作发生的亚细胞定位，对弱互作、瞬时互作灵敏度高，无需裂解细胞，原位检测生理状态下的蛋白互作。
将完整荧光蛋白（如 Venus、YFP）拆分为 N 端、C 端两个无荧光活性的片段，分别与两个待测蛋白融合表达；若两个蛋白在活细胞内发生互作，会带动荧光蛋白片段空间靠近，重构完整有活性的荧光蛋白，产生可检测的荧光信号，实现活细胞内互作的可视化定位。
将完整荧光蛋白（如 Venus、YFP）拆分为 N 端、C 端两个无荧光活性的片段，分别与两个待测蛋白融合表达；若两个蛋白在活细胞内发生互作，会带动荧光蛋白片段空间靠近，重构完整有活性的荧光蛋白，产生可检测的荧光信号，实现活细胞内互作的可视化定位。
详情介绍
实验简图
实验流程
1.构建目的蛋白与荧光蛋白 N/C 端片段的融合载体；
2.载体共转染哺乳动物细胞 / 烟草表皮细胞；
3.避光培养，促进蛋白表达与荧光重构；
4.激光共聚焦显微镜采集荧光图像，判断互作与亚细胞定位。
实验周期
BiFC 双分子荧光互补实验：12-18 个工作日
需提供样品信息
1.待测蛋白 CDS 序列、NCBI 登录号；
2.构建好的融合载体，或委托公司构建；
3.待测细胞系 / 植物实验材料。
应用场景
1.活细胞内蛋白互作可视化验证、亚细胞定位；
2.弱互作、瞬时互作检测；
3.药物干预对蛋白互作的影响检测。
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