Co-IP 免疫共沉淀-蛋白 - 蛋白互作类实验-武汉本脉生物科技有限公司

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技术服务类别

Co-IP 免疫共沉淀

Co-IP 免疫共沉淀是体内蛋白 - 蛋白互作验证的经典金标准技术，无需体外蛋白表达，完全模拟胞内天然构象与微环境，可验证已知蛋白互作、筛选未知互作蛋白，是分子机制研究的必备基础实验，适配绝大多数胞内可溶性蛋白。
在非变性温和裂解条件下，保留细胞内天然形成的蛋白 - 蛋白复合物；通过特异性靶标抗体，捕获诱饵蛋白及其互作结合的猎物蛋白，利用 Protein A/G 琼脂糖 / 磁珠沉降免疫复合物，经严格洗涤去除非特异性结合蛋白，最终通过 Western Blot 或质谱鉴定互作蛋白，反映细胞内生理状态下的真实蛋白互作。

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详情介绍

实验简图

实验流程
1.样本培养与收集，冰上非变性裂解制备总蛋白；
2.特异性抗体与 Protein A/G 磁珠预结合，封闭非特异性结合位点；
3.蛋白裂解液与抗体 - 磁珠复合物孵育，富集诱饵蛋白及互作复合物；
4.多次严格洗涤，去除非特异性吸附杂质；
5.蛋白洗脱变性，通过 Western Blot 验证互作，或送质谱进行未知蛋白筛选。

实验周期
常规 Co-IP+WB 验证：16-20 个工作日
常规 Co-IP+MS 验证：25-30 个工作日

需提供样品信息
1.培养好的细胞样本、冻存组织样本，或构建好的过表达载体；
2.IP 级特异性靶标抗体（可委托公司代购）；
3.目的蛋白名称、NCBI 序列号、互作验证相关信息。

应用场景
1.体内已知蛋白 - 蛋白互作双向验证；
2.信号通路蛋白复合体组分鉴定；
3.药物靶点互作关系验证、翻译后修饰互作研究；
4.结合质谱进行未知互作蛋白高通量筛选。

公司环境仪器设备实验室

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