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技术服务类别
RIP-qPCR RNA 结合蛋白免疫沉淀定量 PCR
RIP-qPCR是体内 RNA - 蛋白互作金标准技术，真实反映生理状态下 RBP 与 mRNA、lncRNA、circRNA 的结合关系，是非编码 RNA 机制研究的核心必备实验。
温和裂解细胞，保留体内天然形成的RNA - 蛋白复合物，通过特异性 RNA 结合蛋白（RBP）抗体，富集蛋白及其结合的 RNA，去除游离蛋白与 DNA 后，纯化结合的 RNA，通过 qPCR 定量靶标 RNA 富集效率，验证体内 RNA - 蛋白互作。
温和裂解细胞，保留体内天然形成的RNA - 蛋白复合物，通过特异性 RNA 结合蛋白（RBP）抗体，富集蛋白及其结合的 RNA，去除游离蛋白与 DNA 后，纯化结合的 RNA，通过 qPCR 定量靶标 RNA 富集效率，验证体内 RNA - 蛋白互作。
详情介绍
实验简图
实验流程
1.活细胞收集，冰上温和裂解，保留 RNA - 蛋白复合物；
2.特异性抗体与磁珠预结合，富集 RBP 及其结合 RNA；
3.严格洗涤去除非特异性结合，DNase 酶消化去除基因组 DNA；
4.纯化 RNA，反转录 cDNA，qPCR 定量靶标 RNA 富集倍数。
实验周期
常规单样本检测：12-16 个工作日
需提供样品信息
1.新鲜培养细胞、冻存组织样本；
2.RBP 特异性 IP 级抗体；
3.靶标 RNA 序列、引物信息。
应用场景
1.体内 RBP 与 lncRNA/circRNA/mRNA 互作验证；
2.非编码 RNA 调控机制、RNA 稳定性、翻译调控研究；
3.miRNA 装载复合物验证。
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