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Technical service category
技术服务类别
LCA 荧光素酶蛋白互补实验
LCA 荧光素酶蛋白互补实验是新一代活细胞定量蛋白互作检测技术，背景信号极低、灵敏度远高于 BiFC，可精准定量互作强弱，适配高通量药物筛选，是动态互作、弱互作检测的优选方案。
将萤火虫荧光素酶拆分为 N 端、C 端两个无酶活性的片段，分别与两个待测蛋白融合；细胞内两个蛋白发生互作时，荧光素酶片段空间靠近重构完整活性酶，催化底物产生化学发光信号，发光强度与互作强度正相关，实现活细胞内互作的定量检测。
将萤火虫荧光素酶拆分为 N 端、C 端两个无酶活性的片段，分别与两个待测蛋白融合；细胞内两个蛋白发生互作时，荧光素酶片段空间靠近重构完整活性酶，催化底物产生化学发光信号，发光强度与互作强度正相关，实现活细胞内互作的定量检测。
详情介绍
实验简图
实验流程
1.构建目的蛋白与荧光素酶 N/C 端片段融合载体；
2.载体共转染待测细胞，设置阴性对照；
3.细胞裂解后加入荧光素酶底物，立即检测化学发光值；
4.归一化处理数据，定量判断蛋白互作强度。
实验周期
常规定量检测：12-18 个工作日
需提供样品信息
1.待测蛋白 CDS 序列、NCBI 登录号；
2.待测细胞系、转染相关要求。
应用场景
1.活细胞内蛋白互作定量检测；
2.弱互作、动态瞬时互作验证；
3.药物、小分子干预蛋白互作的高通量筛选。
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